FAM122A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405370

Descripción general

FAM122A codifica una proteína pequeña y evolutivamente conservada, implicada en la regulación de la actividad de fosfatasas de proteínas y de la señalización dependiente de la fosforilación. Evidencias emergentes vinculan a FAM122A con la modulación de complejos de fosfatasas de serina/treonina, influyendo en la progresión del ciclo celular, las respuestas al estrés y los programas transcripcionales que dependen de la fosforilación reversible. Un equilibrio alterado de fosfatasas puede remodelar las vías que controlan la proliferación, la apoptosis y la diferenciación, lo que convierte a FAM122A en un nodo útil para estudiar la robustez de las redes de señalización. Se ha descrito desregulación de circuitos de fosforilación que involucran a FAM122A en contextos relevantes para la señalización oncogénica y la aptitud celular, lo que respalda su investigación en conjuntos de datos transcriptómicos y proteómicos asociados a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FAM122A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FAM122A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FAM122A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FAM122A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FAM122A.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FAM122A para la investigación de la señalización de FAM122A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FAM122A críticos para la función de FAM122A
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FAM122A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FAM122A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FAM122A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FAM122A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FAM122A (h) y el plásmido HDR FAM122A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FAM122A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FAM122A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.