EXOSC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405751

概要

EXOSC4 は、RNA エキソソーム複合体の中核構成因子をコードしています。RNA エキソソームは、核および細胞質において RNA の監視と分解（ターンオーバー）を担う、多サブユニット型の 3′–5′ エキソリボヌクレアーゼです。EXOSC4 は、rRNA、sn/snoRNA、ならびに異常または不安定な転写産物を含む多様な RNA 分子種のプロセシングと分解を支えることで、RNA 品質管理、リボソーム生合成、そしてトランスクリプトーム恒常性の維持に寄与します。エキソソームの機能は、転写と同時進行する RNA プロセシング、核外輸送、RNA 分解経路と交差し、遺伝子発現プログラムの形成に関わります。エキソソーム関連因子の制御異常は RNA 代謝の変化や細胞ストレス応答と関連づけられており、EXOSC4 は、疾患に関連する状況での RNA プロセシング異常の機構研究において重要なターゲットとなります。

EXOSC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるEXOSC4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、EXOSC4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、EXOSC4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、EXOSC4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、EXOSC4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、EXOSC4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• EXOSC4の機能に不可欠なEXOSC4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、EXOSC4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• EXOSC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびEXOSC4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、EXOSC4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  EXOSC4 HDRプラスミド（h）および EXOSC4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはEXOSC4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のEXOSC4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。