Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ERp72 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-402689-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ERp72 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ERp72, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ERp72 Anticorpo (B-4): sc-390530
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ERp72 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-402689-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PDIA4 codifica a ERp72, uma isomerase de dissulfeto de proteína do retículo endoplasmático (RE) que catalisa a troca tiol–dissulfeto para promover o dobramento oxidativo de proteínas e o controle de qualidade. A ERp72 participa da degradação associada ao RE (ERAD) e da resposta a proteínas mal dobradas (UPR), ajudando a manter a proteostase durante a maturação de proteínas secretórias e o estresse celular. Por meio do seu papel na regulação redox e de funções semelhantes às de chaperonas, PDIA4 está ligada a vias que envolvem sinalização de estresse oxidativo e processamento de antígenos em células secretórias profissionais. A desregulação da proteostase do RE e da atividade de PDIA4 tem sido associada a estados inflamatórios e à biologia tumoral, o que a torna relevante para estudos mecanísticos de adaptação ao estresse e homeostase proteica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ERp72 (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PDIA4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PDIA4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PDIA4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ERp72.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PDIA4 para a investigação da sinalização de ERp72, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PDIA4 críticos para a função ERp72
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PDIA4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ERp72 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ERp72 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PDIA4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ERp72 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ERp72 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PDIA4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PDIA4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.