EFP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402678

개요

TRIM25는 TRIM 계열 단백질로서 E3 유비퀴틴 리가아제 EFP를 암호화하며, 선천면역 신호전달과 RNA 대사를 조절하는 유비퀴틴화 반응을 촉매합니다. EFP는 RIG-I를 유비퀴틴화하여 활성화함으로써 항바이러스 반응을 촉진하고, MAVS, TBK1, IRF3/7을 통한 하위 단계의 I형 인터페론 신호전달을 돕습니다. 또한 NF-κB 관련 염증성 출력도 조절할 수 있습니다. 숙주 방어를 넘어 TRIM25는 RNA 결합 단백질과의 상호작용을 통해 전사 후 조절에 관여하며, 세포주기 및 스트레스 반응 프로그램에도 영향을 미칩니다. TRIM25 활성이 조절 이상을 보이면 인터페론 기저 수준 변화, 바이러스 감수성, 그리고 종양 생물학 및 내분비 신호전달에서의 맥락 의존적 역할과 연관되는 것으로 보고되어, 염증 및 암 연구에서 중요한 노드로 여겨집니다.

EFP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TRIM25 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TRIM25 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TRIM25의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 EFP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 EFP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TRIM25 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• EFP 기능에 중요한 TRIM25 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TRIM25 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• EFP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 EFP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TRIM25 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  EFP HDR 플라스미드 (h) 및 EFP HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TRIM25 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TRIM25 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.