EBF4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402438

개요

EBF4(early B-cell factor 4)는 EBF 계열에 속하는 헬릭스-루프-헬릭스(helix–loop–helix) 전사인자로, DNA에 결합해 세포 운명 결정과 조직 분화에 연관된 유전자 발현 프로그램을 조절합니다. 염색질 조절 및 발달 신호전달과 교차하는 전사 네트워크를 조율함으로써, EBF4는 신경계 및 면역 관련 유전자 발현과 같은 계통(lineage) 관련 과정에 영향을 줄 수 있습니다. EBF 계열의 전사 회로에 대한 조절 이상은 신경발달 표현형과 암 관련 전사 재프로그래밍 등 다양한 맥락에서 연구되어 왔으며, 이러한 점에서 EBF4는 분화 조절 이상을 연구하는 데 유용한 핵심 지점으로 여겨집니다. EBF4의 기능을 분석하면 하위 표적, 프로모터/인핸서 결합(점유), 그리고 증식과 세포 정체성에 대한 경로 수준의 효과를 기전적으로 규명하는 데 도움이 됩니다.

EBF4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 EBF4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 EBF4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 EBF4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 EBF4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 EBF4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 EBF4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• EBF4 기능에 중요한 EBF4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 EBF4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• EBF4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 EBF4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 EBF4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  EBF4 HDR 플라스미드 (h) 및 EBF4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 EBF4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 EBF4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.