EAP1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-408947

개요

IRF2BPL은 전사 조절과 유비퀴틴 의존적 단백질 안정성 조절에 관여하는 핵 내 RING-finger 단백질인 EAP1을 암호화합니다. EAP1은 세포주기 진행, 분화, 신경세포 항상성에 영향을 미치는 유전자 발현 프로그램의 조절과 연관되어 있으며, 이는 단백질 항상성(proteostasis)과 스트레스 반응성 신호전달에서의 역할과도 부합합니다. IRF2BPL의 유전적 기능 이상은 신경발달 및 신경퇴행성 표현형과 관련되어 있어, 신경세포 유지 및 시냅스 기능을 관장하는 경로에서의 중요성을 뒷받침합니다. 따라서 IRF2BPL/EAP1은 인간 모델 시스템에서 전사 조절, 유비퀴틴화와 연계된 단백질 분해(turnover), 그리고 세포 회복탄력성의 기전에 대한 연구 대상으로 다뤄집니다.

EAP1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 IRF2BPL 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 IRF2BPL 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 IRF2BPL의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 EAP1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 EAP1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 IRF2BPL 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• EAP1 기능에 중요한 IRF2BPL 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 IRF2BPL 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• EAP1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 EAP1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 IRF2BPL 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  EAP1 HDR 플라스미드 (h) 및 EAP1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 IRF2BPL 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 IRF2BPL 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.