DYNC2H1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406180

개요

DYNC2H1은 세포질 다이네인 2 중쇄(cytoplasmic dynein 2 heavy chain)를 암호화하며, 섬모 끝에서 기저부로 물질을 되돌려 운반하는 섬모내 수송(IFT) 기계의 주요 역행(레트로그레이드) 모터입니다. DYNC2H1은 ATP 구동 운동성을 IFT-A 및 화물 어댑터 복합체와 결합시켜 1차 섬모의 조립과 유지에 필수적이며, Hedgehog 경로의 동역학을 포함한 섬모 의존적 신호전달에도 중요한 역할을 합니다. DYNC2H1이 교란되면 섬모 구조가 손상되고 발달 신호전달 출력이 변화하여, 이 유전자는 골격 및 발달 관련 표현형을 특징으로 하는 인간 섬모병(ciliopathy)과 연관됩니다. 이러한 기능들로 인해 DYNC2H1은 섬모 생물학, 소기관 수송, 그리고 경로 조절성 전사 프로그램을 연구하는 데 유용한 핵심 노드가 됩니다.

DYNC2H1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DYNC2H1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DYNC2H1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DYNC2H1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DYNC2H1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DYNC2H1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DYNC2H1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DYNC2H1 기능에 중요한 DYNC2H1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DYNC2H1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DYNC2H1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 DYNC2H1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DYNC2H1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DYNC2H1 HDR 플라스미드 (h) 및 DYNC2H1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DYNC2H1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DYNC2H1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.