DUOX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-430265
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DUOX1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DUOX1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DUOX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-430265 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Duox1 codifica a dual oxidase 1 (DUOX1), uma enzima da família das NADPH oxidases que gera peróxido de hidrogênio na superfície celular e ao longo de vias secretórias. Em epitélios e tecidos mucosos de camundongos, as espécies reativas de oxigênio derivadas de DUOX1 contribuem para a sinalização redox, a defesa inata do hospedeiro e a regulação de processos como o reparo de feridas e as respostas inflamatórias. A atividade de DUOX1 interage com a sinalização dependente de cálcio e influencia vias a jusante sensíveis a sinais oxidativos, incluindo programas transcricionais associados a MAPK e NF-κB. A produção desregulada de EROs mediada por DUOX1 tem sido implicada em modelos de inflamação das vias aéreas, disfunção da barreira epitelial e biologia do estresse oxidativo relevante para mecanismos de doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DUOX1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Duox1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Duox1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Duox1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DUOX1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Duox1 para a investigação da sinalização de DUOX1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Duox1 críticos para a função DUOX1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Duox1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DUOX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo DUOX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Duox1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DUOX1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR DUOX1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Duox1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Duox1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.