DIO2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402262

개요

DIO2는 II형 요오드티로닌 탈요오드화효소(type II iodothyronine deiodinase)를 암호화하며, 이는 소포체에 연관된 셀레늄 효소로서 티록신(T4)을 활성 호르몬인 트리요오드티로닌(T3)으로 전환하는 외환(outer-ring) 탈요오드화 반응을 촉매합니다. DIO2는 세포 내 T3의 가용성을 조절함으로써, 에너지 대사, 열발생, 지질 및 포도당 항상성, 그리고 조직 맥락에 따른 분화를 조절하는 갑상선호르몬 수용체 의존적 전사 프로그램을 형성합니다. DIO2 활성은 셀레노단백질 합성과 효소의 안정성 및 분해(turnover)에 영향을 미치는 산화 스트레스 반응을 포함한 산화환원(redox) 및 셀레늄 생물학과 통합되어 있습니다. DIO2의 발현 또는 기능 변화는 대사적 표현형 및 갑상선호르몬 반응성 병태생리와 연관되어 왔으며, 내분비 조절, 비만 관련 기전, 조직 특이적 갑상선호르몬 신호전달에서 DIO2를 연구할 근거를 제공합니다.

DIO2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DIO2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DIO2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DIO2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DIO2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DIO2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DIO2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DIO2 기능에 중요한 DIO2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DIO2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DIO2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 DIO2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DIO2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DIO2 HDR 플라스미드 (h) 및 DIO2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DIO2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DIO2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.