DAX-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419053

개요

Nr0b1는 DAX-1(NR0B1)을 암호화하는데, DAX-1은 비정형 고아(orphan) 핵 수용체로서 주로 스테로이드 생성 및 생식 관련 조직에서 전사 보조조절인자(transcriptional coregulator)로 기능합니다. DAX-1은 SF-1/NR5A1과 같은 인자들이 조절하는 전사 프로그램을 억제하거나 미세 조정함으로써 핵 수용체 신호전달 네트워크를 조절하고, 그 결과 스테로이드 호르몬 생합성, 부신 발달, 시상하부–뇌하수체–생식샘(HPG) 축 조절에 영향을 미칩니다. 마우스 모델에서 DAX-1 활성의 변화는 생식샘 분화, 생식세포 형성, 내분비 항상성에 영향을 주며, 따라서 Nr0b1는 발달 유전자 조절과 스테로이드 생성 경로 제어를 연구하는 데 중요한 표적으로 간주됩니다. NR0B1 상동유전자의 조절 이상은 선천성 부신 및 생식 관련 표현형과 연관되어 있어, 내분비 발달과 성 결정 경로의 기전 연구에서 NR0B1를 활용할 근거를 뒷받침합니다.

DAX-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Nr0b1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Nr0b1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Nr0b1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DAX-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DAX-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Nr0b1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DAX-1 기능에 중요한 Nr0b1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Nr0b1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DAX-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 DAX-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Nr0b1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DAX-1 HDR 플라스미드 (m) 및 DAX-1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Nr0b1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Nr0b1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.