CRSP130 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406593

概要

MED23は、配列特異的転写因子とRNAポリメラーゼIIを結び付け、転写開始およびシグナル依存的な遺伝子発現プログラムを協調的に制御するメディエーター複合体の中核サブユニットであるCRSP130をコードします。CRSP130は、発生過程やストレス応答経路からの制御入力を統合し、プロモーター活性やクロマチン関連の転写制御を調節するのに寄与します。メディエーター依存的に広範な遺伝子ネットワークを制御することを通じて、MED23は細胞増殖や分化状態の変化、ならびに複数の疾患コンテキストにわたって観察される転写出力の破綻と関連づけられてきました。転写回路における中心的役割から、MED23はヒト細胞モデルにおいて、経路からプロモーターへの情報伝達や転写因子依存性を解析するための有用な標的となります。

CRSP130 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMED23遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MED23内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MED23のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CRSP130タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CRSP130シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MED23欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CRSP130の機能に不可欠なMED23エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MED23ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CRSP130 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCRSP130 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MED23遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CRSP130 HDRプラスミド（h）および CRSP130 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMED23ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMED23標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。