CNG-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403946-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CNG-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CNG-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CNG-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CNGA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CNG-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403946-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CNG-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403946-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CNGA1 codifica a subunidade alfa do canal de nucleotídeos cíclicos ativado por cGMP dos bastonetes (CNG-1), um efetor-chave da cascata de fototransdução nos fotorreceptores do tipo bastonete da retina. O CNG-1 forma um canal catiônico regulado por cGMP que conecta alterações de cGMP induzidas pela luz ao potencial de membrana, controlando o influxo de Na⁺/Ca²⁺ e a sinalização subsequente dependente de Ca²⁺, que molda a adaptação visual e a recuperação. Por essa via, o CNGA1 integra-se aos processos de metabolismo de cGMP e de homeostase de Ca²⁺ que mantêm a função dos bastonetes na visão em baixa luminosidade. A interrupção genética ou a disfunção de CNGA1 está associada a fenótipos hereditários de degeneração retiniana, reforçando sua relevância para estudos mecanísticos da fisiologia dos bastonetes e de alterações de sinalização relacionadas a doenças.
CNG-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CNGA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CNGA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CNGA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CNGA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.