Plasmide Double Nickase (h) claudin-6: sc-403405-NIC

Le gène humain **CLDN6** code la claudine-6, un composant transmembranaire à quatre passages des brins de jonctions serrées, qui régule la perméabilité paracellulaire et l’intégrité de la barrière épithéliale. La claudine-6 participe à l’organisation des complexes jonctionnels et aux programmes de polarité grâce à des interactions avec des protéines d’échafaudage telles que les membres de la famille ZO, reliant l’architecture membranaire à la dynamique du cytosquelette. Son expression est régulée au cours du développement et est souvent associée à des états de différenciation épithéliale, ce qui fait de **CLDN6** un marqueur utile pour les études de lignée et d’état cellulaire. Une signalisation des jonctions serrées dérégulée et des profils d’expression des claudines altérés sont largement impliqués dans le remodelage épithélial et dans des changements associés aux tumeurs touchant l’adhésion, l’invasion et la fonction barrière, ce qui justifie l’étude de **CLDN6** dans des modèles pertinents pour les maladies.

claudin-6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CLDN6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CLDN6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CLDN6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CLDN6.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.