Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
CHMP1A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406556
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CHMP1A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CHMP1A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CHMP1A Anticorpo (B-5): sc-271617
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CHMP1A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406556 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CHMP1A (proteína 1A do corpo multivesicular carregado) é um componente central da maquinaria ESCRT-III, que remodela membranas para impulsionar a biogênese de corpos multivesiculares e a triagem de cargas endossomais direcionadas à degradação lisossomal. Por meio de processos dependentes de ESCRT, a CHMP1A contribui para a downregulation de receptores, eventos de cisão de membrana e uma regulação mais ampla da proteostase, da citocinese e da dinâmica do envelope nuclear. A perturbação do tráfego endolisossomal associado à CHMP1A pode alterar a duração de vias de sinalização e a homeostase celular, ligando a disfunção de ESCRT a fenótipos do neurodesenvolvimento e a outros distúrbios caracterizados por tráfego de membrana prejudicado. Como gene humano, CHMP1A é frequentemente estudado em contextos em que a maturação de endossomos e o controle da sinalização mediada por vesículas são centrais para estados celulares relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CHMP1A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CHMP1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CHMP1A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CHMP1A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CHMP1A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CHMP1A para a investigação da sinalização de CHMP1A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CHMP1A críticos para a função CHMP1A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CHMP1A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CHMP1A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CHMP1A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CHMP1A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CHMP1A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CHMP1A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CHMP1A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CHMP1A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.