cerberus CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-417362

개요

CER1은 세포 밖으로 분비되는 길항인자인 cerberus를 암호화하며, BMP, NODAL/TGF-β, WNT 계열의 구성원들과 결합해 이들을 억제함으로써 세포외 신호 그라디언트를 조절하는 핵심 모폴로겐 경로들을 조절합니다. 이러한 상호작용을 통해 cerberus는 SMAD 및 β-카테닌 의존적 전사 프로그램을 제한하여 중배엽·내배엽(메센도더름) 운명 결정과 전방 신경 발달을 포함한 배아 패터닝 결정에 기여합니다. CER1 발현의 조절 이상은 비정상적 분화, 상피-간엽 전이(EMT), 성장인자 신호전달 변화와 관련된 맥락에서 보고되어 왔으며, 발생 장애와 종양성 경로 재배선에 대한 연구에서도 중요한 표적이 됩니다. 또한 분비성 조절자인 CER1은 줄기세포 분화 및 오가노이드 모델에서 세포 운명에 대한 측분비(paracrine) 조절을 규명하는 데에도 유용합니다.

cerberus CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CER1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CER1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CER1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 cerberus 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 cerberus 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CER1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• cerberus 기능에 중요한 CER1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CER1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• cerberus CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 cerberus CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CER1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  cerberus HDR 플라스미드 (h) 및 cerberus HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CER1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CER1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.