Centrin-2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400867

개요

CETN2는 중심립 복제, 중심체(centrosome) 무결성, 그리고 세포분열 동안 방추체(spindle) 조직화에 기여하는, 중심체와 기저체(basal body)에 국소화되는 보존된 EF-hand 칼슘 결합 단백질인 centrin-2를 암호화합니다. Centrin-2는 1차 섬모(primary cilium)의 조립과 기능에도 관여하여, CETN2의 활성이 세포주기 조절 및 섬모형성(ciliogenesis)과 같은 미세소관 기반 과정과 연결되도록 합니다. 중심체 항상성과 섬모 신호전달 네트워크에서의 역할을 통해, centrin-2의 동역학 변화는 유전체 안정성과 세포 분화 프로그램에 영향을 줄 수 있으며, 이는 암 및 섬모병(ciliopathy) 관련 생물학에서 흔히 교란되는 요소입니다. 따라서 CETN2는 인간 세포에서 중심체 관련 경로, 유사분열의 정확성, 그리고 섬모 의존적 신호전달 출력들을 조사하기 위한 분자적 도구로 널리 활용됩니다.

Centrin-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CETN2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CETN2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CETN2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Centrin-2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Centrin-2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CETN2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Centrin-2 기능에 중요한 CETN2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CETN2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Centrin-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Centrin-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CETN2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Centrin-2 HDR 플라스미드 (h) 및 Centrin-2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CETN2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CETN2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.