CD203c Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431648
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD203c O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD203c, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD203c Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-431648 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Enpp3 codifica a ectonucleotídeo pirofosfatase/fosfodiesterase 3 (CD203c), uma ectoenzima de superfície celular que hidrolisa nucleotídeos extracelulares para regular a sinalização purinérgica e o equilíbrio entre mediadores pró- e anti-inflamatórios. Em células imunes de camundongo, o CD203c contribui para o metabolismo de nucleotídeos extracelulares, o que pode influenciar vias dependentes de adenosina/ATP que moldam limiares de ativação, migração e respostas de citocinas. Sua expressão é comumente associada à biologia de basófilos e mastócitos, nos quais pode modular programas ligados à degranulação e os resultados de sinalização próximos ao receptor. O processamento desregulado de nucleotídeos extracelulares e estados de ativação imune associados ao CD203c são relevantes em modelos de inflamação do tipo alérgica e outros fenótipos mediados pelo sistema imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD203c (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Enpp3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Enpp3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Enpp3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD203c.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Enpp3 para a investigação da sinalização de CD203c, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Enpp3 críticos para a função CD203c
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Enpp3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD203c Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD203c Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Enpp3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD203c Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD203c (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Enpp3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Enpp3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.