Date published: 2026-7-18

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cathepsin L双切口酶质粒(h): sc-400804-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • cathepsin L 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • cathepsin L双切酶质粒(h)和cathepsin L双切酶质粒(h2)编码针对CTSL的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:cathepsin L: sc-32320,通过WB, IF或者IHC分析
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    cathepsin L双切口酶质粒(h)

    sc-400804-NIC
    20 µg
    $410.00

    cathepsin L双切口酶质粒(h2)

    sc-400804-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    CTSL 编码人源组织蛋白酶 L(cathepsin L),这是一种溶酶体半胱氨酸蛋白酶,通过内体-溶酶体降解介导细胞内蛋白质周转,并通过 MHC II 类通路参与抗原加工。组织蛋白酶 L 还参与自噬-溶酶体通量,通过细胞周围蛋白水解促进细胞外基质重塑,并在酸性细胞区室内对部分前体蛋白进行受调控的加工。CTSL 活性或表达失调与蛋白稳态改变及癌生物学中的细胞侵袭行为有关;在溶酶体功能受损的炎症和神经退行性疾病背景中也有相关联。作为溶酶体依赖性分解代谢的核心节点,CTSL 常被用于研究囊泡运输、蛋白酶网络以及内体-溶酶体系统在应激条件下的适应性重塑。

    cathepsin L 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CTSL 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTSL内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CTSL的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CTSL基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。