casein kinase IIβ Plasmide Double Nickase (h): sc-401684-NIC

CSNK2B codifica la subunità regolatoria beta della protein chinasi CK2, un complesso chinasi serina/treonina costitutivamente attivo che modula la selezione dei substrati, la stabilità e l’assemblaggio delle subunità catalitiche. La segnalazione di CK2 influenza il controllo, dipendente dalla fosforilazione, della progressione del ciclo cellulare, delle risposte al danno al DNA, dell’apoptosi e del processamento dell’RNA, interfacciandosi con vie quali NF-κB, Wnt/β-catenina e PI3K/AKT. Attraverso un’ampia fosforegolazione di fattori di trascrizione e proteine associate alla cromatina, CSNK2B contribuisce all’adattamento allo stress cellulare e alla proteostasi. Un’attività di CK2 deregolata e un’espressione alterata di CSNK2B sono state collegate a programmi di segnalazione oncogeni e a fenotipi neuroevolutivi, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici delle reti di fosforilazione.

casein kinase IIβ Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CSNK2B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CSNK2B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CSNK2B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CSNK2B interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.