Plasmide Double Nickase (h) CAMTA1: sc-405328-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CAMTA1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CAMTA1 Double Nickase (h) et le plasmide CAMTA1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CAMTA1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CAMTA1 | sc-405328-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CAMTA1 | sc-405328-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CAMTA1 code l’activateur transcriptionnel 1 liant la calmoduline, un facteur de transcription nucléaire qui couple la signalisation Ca2+/calmoduline aux programmes d’expression génique. Grâce à son domaine de liaison à l’ADN CG-1 et à ses répétitions d’ankyrine régulatrices, CAMTA1 intègre des signaux dépendants du calcium aux mécanismes de contrôle de la chromatine et de la transcription, influençant la différenciation neuronale, la transcription liée à l’activité synaptique et, plus largement, des voies de réponse au stress. Une régulation altérée de CAMTA1 a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs, et des altérations génomiques de CAMTA1 sont observées de manière récurrente dans plusieurs cancers, ce qui souligne sa pertinence pour l’étude de la dérégulation transcriptionnelle. Ces caractéristiques font de CAMTA1 une cible utile pour disséquer les réseaux transcriptionnels pilotés par le calcium et les transitions d’état cellulaire dans des systèmes modèles humains.
CAMTA1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CAMTA1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CAMTA1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CAMTA1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CAMTA1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.