Plasmide Double Nickase (h) CAMP: sc-400651-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CAMP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CAMP Double Nickase (h) et le plasmide CAMP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CAMP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LL-37 Antibody (D-5): sc-166770
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CAMP | sc-400651-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CAMP | sc-400651-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **CAMP** code le peptide antimicrobien cathelicidine (LL-37), un effecteur cationique de défense de l’hôte produit par les cellules épithéliales et les lignées myéloïdes. CAMP contribue aux voies de l’immunité innée en perturbant directement les membranes microbiennes et en modulant la signalisation des récepteurs de reconnaissance des motifs (PRR), la chimiotaxie et les réponses cytokiniques au cours de l’inflammation. Au-delà de son activité antimicrobienne, LL-37 influence l’homéostasie de la barrière épithéliale, les programmes de réparation des plaies et le recrutement leucocytaire dans les tissus muqueux. Une expression dérégulée de CAMP a été associée à des affections inflammatoires de la peau et des voies aériennes, à une susceptibilité modifiée aux infections et à un remodelage immunitaire associé aux tumeurs, ce qui en fait un point d’entrée pertinent pour étudier la signalisation immunométabolique et celle du microenvironnement.
CAMP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CAMP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CAMP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CAMP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CAMP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.