Plásmido Doble Nickase (h) cadherin-7: sc-401847-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)cadherin-7 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa cadherin-7 (h) y el plásmido de doble nickasa cadherin-7 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CDH7. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) cadherin-7 | sc-401847-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) cadherin-7 | sc-401847-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH7 codifica la cadherina-7, una molécula de adhesión célula–célula dependiente de calcio que favorece el reconocimiento selectivo entre células y el mantenimiento de la arquitectura tisular, en particular en contextos neurales y epiteliales. Mediante unión homofílica y su conexión con cateninas, la cadherina-7 ayuda a coordinar la organización de las uniones adherentes, la dinámica del citoesqueleto y programas de señalización dependientes del contacto que influyen en la migración y la diferenciación celular. La alteración de la adhesión mediada por cadherinas se asocia con frecuencia a cambios en la morfogénesis, la plasticidad epitelio–mesénquima y fenotipos invasivos, lo que convierte a CDH7 en un nodo relevante en estudios sobre la diseminación tumoral y procesos del neurodesarrollo. Como parte de la red más amplia de cadherinas, la perturbación de CDH7 puede utilizarse para investigar cómo las señales de adhesión se integran con vías que controlan la polaridad, la estabilidad de las uniones y el estado transcripcional.
cadherin-7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CDH7 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CDH7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CDH7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CDH7 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.