Plasmide CRISPR/Cas9 KO cadherin-26 (h): sc-401989

Présentation

CDH26 code la cadhérine‑26, une molécule d’adhérence cellulaire calcium‑dépendante de la superfamille des cadhérines, qui contribue à la régulation de l’architecture épithéliale et de l’organisation des jonctions intercellulaires. En influençant la dynamique d’adhérence et les propriétés de barrière des tissus, la cadhérine‑26 peut moduler des processus tels que la différenciation épithéliale, la signalisation dépendante du contact et la migration cellulaire. Des altérations de l’expression de CDH26 ont été rapportées dans des contextes de muqueuses inflammatoires, ce qui étaye sa pertinence pour l’étude des interactions épithélio‑immunitaires et de la physiopathologie liée à la barrière.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO cadherin-26 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CDH26 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CDH26, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CDH26 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine cadherin-26.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CDH26 pour l'étude de la signalisation de cadherin-26, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de CDH26 essentiels à la fonction de cadherin-26
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CDH26 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le cadherin-26 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le cadherin-26 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CDH26. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le cadherin-26 plasmide HDR (h) et le cadherin-26 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CDH26 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CDH26 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.