BTBD14B Lentiviral Activation Particles (h): sc-410250-LAC

NACC1 kodiert BTBD14B, einen nukleären Faktor mit BTB/POZ-Domäne, der über Protein-Protein-Interaktionen an der Transkriptionskontrolle und der chromatinassoziierten Regulation beteiligt ist. Dieses Gen wurde mit Programmen in Verbindung gebracht, die Zellproliferation, Überleben und Differenzierung steuern, mit nachgeschalteten Effekten auf Signalwege, die den Zellzyklusverlauf und Stressantworten prägen. Eine veränderte NACC1-Expression wurde in verschiedenen Krankheitskontexten beschrieben, darunter in der Krebsbiologie und bei neuroentwicklungsbezogenen Phänotypen, was seine Nutzung als funktionellen Knoten in Studien zu regulatorischen Netzwerken stützt. Als transkriptionsassoziierter Faktor wird BTBD14B häufig hinsichtlich seines Beitrags zu Genexpressionszuständen und zellulärer Plastizität untersucht.

BTBD14B Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NACC1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

BTBD14B Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NACC1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen BTBD14B-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NACC1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.