Plasmide Double Nickase (h) ATF-2: sc-416662-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ATF-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ATF-2 Double Nickase (h) et le plasmide ATF-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ATF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ATF-2 Antibody (F2BR-1): sc-242
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ATF-2 | sc-416662-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ATF-2 | sc-416662-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATF2 code pour le facteur de transcription activateur 2 (ATF-2), un facteur de transcription bZIP qui forme des homo- ou hétérodimères avec des membres de la famille AP‑1 afin de réguler l’expression de gènes sensibles aux stimuli. ATF‑2 est activé par phosphorylation en aval de voies MAPK activées par le stress, notamment JNK et p38, reliant le stress extracellulaire, la signalisation des dommages à l’ADN et les signaux inflammatoires à des programmes transcriptionnels contrôlant la prolifération, l’apoptose et la différenciation. En modulant l’expression de cytokines, des régulateurs du cycle cellulaire et des processus associés à la chromatine, ATF‑2 influence l’adaptation cellulaire au stress oxydatif et génotoxique. Une activité d’ATF‑2 dérégulée a été impliquée dans la signalisation oncogénique, le comportement métastatique et des réponses immunitaires ou au stress altérées, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la biologie tumorale et du remodelage des voies de réponse au stress.
ATF-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ATF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ATF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ATF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ATF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.