ARP-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405241

개요

NR2F2는 인간 고아(리간드가 알려져 있지 않은) 핵 수용체인 ARP-1(또는 COUP-TFII)을 암호화하며, ARP-1은 리간드 비의존성 전사인자로서 단량체 또는 이형이합체 형태로 DNA에 결합해 발달 및 대사 관련 유전자 프로그램을 조절합니다. ARP-1은 핵 수용체 간 크로스토크 및 인핸서 활성과 연계된 네트워크를 전사적으로 제어함으로써, 세포 운명 결정, 혈관신생 및 림프관신생 과정, 그리고 기관형성에 영향을 미치는 신호 입력을 통합합니다. 성체 조직에서 NR2F2는 혈관 평활근과 내피 세포의 생물학, 지방세포 분화, 미토콘드리아/대사 항상성에 관여하며, 증식과 분화에는 맥락 의존적인 효과를 보입니다. NR2F2의 발현 또는 활성 조절 이상은 암 생물학, 선천성 심혈관 결함, 대사 질환과 연관되어 있어, 전사 조절과 계통(라인리지) 결정의 기전을 연구하는 데 널리 활용되는 핵심 노드로 여겨집니다.

ARP-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NR2F2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NR2F2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NR2F2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ARP-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ARP-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NR2F2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ARP-1 기능에 중요한 NR2F2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NR2F2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ARP-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ARP-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NR2F2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ARP-1 HDR 플라스미드 (h) 및 ARP-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NR2F2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NR2F2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.