Plasmide Double Nickase (m) ANP32B: sc-426661-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ANP32B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ANP32B Double Nickase (m) et le plasmide ANP32B Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Anp32b. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ANP32B | sc-426661-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) ANP32B | sc-426661-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Anp32b code la protéine nucléaire phosphoprotéique acide 32, membre B (ANP32B), une protéine nucléaire conservée qui participe à la régulation de la transcription associée à la chromatine, au traitement de l’ARN et au contrôle du cycle cellulaire. ANP32B a été associée à la modulation de la dynamique d’acétylation des histones et de la signalisation des phosphatases protéiques, soutenant des programmes qui influencent la prolifération, la différenciation et les réponses cellulaires au stress. Dans les modèles murins, la perturbation de Anp32b peut affecter la sensibilité à l’apoptose ainsi que les réponses transcriptionnelles inflammatoires ou antivirales, ce qui la rend pertinente pour l’étude de la biologie tumorale, de la neurobiologie et des interactions hôte–pathogène. Sa localisation nucléaire et ses caractéristiques de type échafaudage font également d’ANP32B un nœud utile pour disséquer les mécanismes de régulation épigénétique et les voies du métabolisme de l’ARN.
ANP32B Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Anp32b dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Anp32b. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Anp32b. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Anp32b.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.