Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419041

Descripción general

La angiopoyetina 1 (ANGPT1; Ang-1) es un factor de crecimiento vascular secretado que se une a la tirosina quinasa receptora endotelial TIE2/TEK para promover la maduración de los vasos, la supervivencia endotelial y la estabilización de la barrera. En tejidos de ratón, la señalización de ANGPT1 coordina el reclutamiento de pericitos, la remodelación de la matriz extracelular y las respuestas anti-permeabilidad, contrarrestando señales desestabilizadoras durante la gemación angiogénica. Esta vía contribuye a la regulación de la quiescencia vascular y del tráfico de células inflamatorias al modular la integridad de las uniones y los programas de activación endotelial. La desregulación de la señalización ANGPT1–TIE2 se ha implicado en la angiogénesis patológica y en fenotipos de fuga vascular relevantes para la remodelación del microambiente tumoral, modelos de lesión isquémica y la investigación de enfermedades vasculares inflamatorias.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Angpt1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Angpt1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Angpt1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Angpt1 para la investigación de la señalización de Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Angpt1 críticos para la función de Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Angpt1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Angpt1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m) y el plásmido HDR Angiopoietin 1/Ang-1/ANGPT1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Angpt1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Angpt1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.