Amylase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400533-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Amylase 2aO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Amylase 2a (h) e o Plasmídeo Double Nickase Amylase 2a (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AMY2A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Amylase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400533-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Amylase 2a Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400533-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMY2A codifica a α-amilase pancreática, uma hidrolase de glicosídeos secretada que inicia a digestão do amido da dieta ao clivar ligações glicosídicas internas α-1,4, gerando maltose e oligossacarídeos. Sua expressão está intimamente ligada à identidade das células acinares e a programas secretórios regulados, integrando-se a vias do pâncreas exócrino que dão suporte ao processamento de nutrientes e à homeostase das enzimas digestivas. AMY2A é comumente usada como marcador funcional de diferenciação exócrina pancreática e de produção de enzimas em modelos celulares e organoides. Alterações na abundância ou atividade da amilase são frequentemente avaliadas em estudos de estresse pancreático e estados inflamatórios, bem como em contextos metabólicos que influenciam a capacidade digestiva.
Amylase 2a O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AMY2A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AMY2A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AMY2A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AMY2A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.