Amphiregulin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400987-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AmphiregulinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Amphiregulin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Amphiregulin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AREG. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Amphiregulin Anticorpo (G-4): sc-74501
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Amphiregulin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400987-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Amphiregulin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400987-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O AREG humano codifica a anfierregulina, um ligante do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR/ERBB) produzido como um precursor ancorado à membrana que pode ser clivado proteoliticamente para gerar uma molécula sinalizadora solúvel. A anfierregulina ativa vias dependentes de EGFR, incluindo RAS–RAF–MEK–ERK e PI3K–AKT, para regular a proliferação e a sobrevivência epiteliais e o reparo tecidual, além de contribuir para a comunicação parácrina entre os compartimentos estromal e imune. A expressão de AREG é induzível por estímulos inflamatórios e é frequentemente estudada em contextos de cicatrização de feridas, fibrose e sinalização associada a tumores, nos quais a atividade da via do EGFR influencia a plasticidade celular e a remodelação do microambiente.
Amphiregulin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AREG em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AREG. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AREG. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AREG interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.