Ameloblastin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403086-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AmeloblastinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ameloblastin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ameloblastin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AMBN. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ameloblastin Anticorpo (H-2): sc-271012
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ameloblastin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403086-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ameloblastin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403086-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AMBN codifica a ameloblastina, uma proteína secretada da matriz do esmalte expressa por ameloblastos, que contribui para a formação do esmalte ao regular a organização da matriz extracelular, a deposição mineral e a adesão na interface entre o ameloblasto e a matriz. A ameloblastina participa de programas de desenvolvimento que coordenam a polaridade e a diferenciação de células epiteliais, bem como o remodelamento da matriz durante a morfogênese dentária, e seus produtos de processamento podem influenciar a sinalização célula–matriz. A disrupção da função de AMBN está associada a defeitos do esmalte e a alterações no comportamento dos ameloblastos, e a desregulação de AMBN é usada como marcador em estudos de diferenciação odontogênica e de patologias relacionadas. Essas características tornam AMBN um locus útil para investigar a biologia da matriz extracelular, os processos de mineralização e as interações epitélio–mesênquima em pesquisas craniofaciais.
Ameloblastin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AMBN em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AMBN. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AMBN. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AMBN interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.