Aldolase B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-432929

개요

Aldob는 과당-1,6-비스인산과 과당-1-인산을 절단해 트리오스 인산을 생성하는 해당작용 및 과당분해 효소인 알돌레이스 B를 암호화하며, 이를 통해 탄수화물 분해를 하위 에너지 생성과 생합성 대사 흐름에 연결합니다. 마우스에서 알돌레이스 B 활성은 주로 간세포와 근위 신세뇨관 세포에서 두드러지며, 간의 포도당 항상성, 과당 대사, 그리고 금식 및 섭식 주기 동안의 대사 적응을 뒷받침합니다. ALDOB 기능의 교란은 전형적으로 과당 처리 장애 및 해당작용/당신생 균형의 보다 광범위한 이상과 연관되어 있어, 대사 스트레스 반응과 간세포 생리를 연구하는 데 중요합니다. 또한 Aldob는 간 중심 질환 모델에서 해당작용, 당신생, 과당 유도 신호전달 사이의 경로 간 상호작용을 규명하기 위한 다루기 쉬운 핵심 지점이 되기도 합니다.

Aldolase B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Aldob 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Aldob 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Aldob의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Aldolase B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Aldolase B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Aldob 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Aldolase B 기능에 중요한 Aldob 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Aldob 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Aldolase B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Aldolase B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Aldob 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Aldolase B HDR 플라스미드 (m) 및 Aldolase B HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Aldob 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Aldob 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.