AIM1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-410680

Panoramica

AIM1 (absent in melanoma 1) codifica una proteina associata al citoscheletro, implicata nell’organizzazione di strutture ricche di actina e nel mantenimento dell’architettura cellulare. È stata collegata alla regolazione della forma cellulare, dell’adesione e del comportamento migratorio attraverso effetti sulla dinamica del citoscheletro e sulle relative reti di segnalazione. Un’alterata espressione di AIM1 o la sua disruption genomica sono state riportate in molteplici tipi di tumore, a supporto del suo impiego come bersaglio di ricerca negli studi su trasformazione, invasione e fenotipi metastatici. AIM1 è inoltre studiata nel contesto della differenziazione di linea e dell’organizzazione tissutale, dove il rimodellamento del citoscheletro è centrale nelle transizioni dello stato cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO AIM1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene AIM1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del AIM1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto AIM1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina AIM1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di AIM1 per lo studio della segnalazione di AIM1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni AIM1 critici per la funzione di AIM1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di AIM1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal AIM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal AIM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus AIM1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal AIM1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR AIM1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia AIM1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio AIM1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.