AFF4 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406238

개요

AFF4(AFF4/FMR2 패밀리 멤버 4)는 핵 내 전사 조절 단백질을 암호화하며, RNA 중합효소 II가 생산적인 신장(elongation) 단계로 전환하는 과정을 조율하는 Super Elongation Complex(SEC)의 핵심 구성 요소로 기능합니다. AFF4는 P-TEFb 및 ELL 단백질과 같은 신장 인자들과의 상호작용을 통해 자극 반응성 유전자의 빠른 유도를 지원하고, 염색질 연관 전사 프로그램에도 영향을 미칩니다. AFF4 의존적 전사 신장 조절은 세포 정체성, 증식, 스트레스 반응 경로의 조절에 기여합니다. 또한 SEC 활성의 이상 조절과 AFF4 관련 전사 회로의 변화는 종양성 유전자 발현 프로그램 및 비정상적인 RNA 중합효소 II 신장에 의해 유발되는 기타 질환과도 관련이 있습니다.

AFF4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 AFF4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 AFF4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 AFF4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 AFF4 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 AFF4 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 AFF4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• AFF4 기능에 중요한 AFF4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 AFF4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• AFF4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 AFF4 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 AFF4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  AFF4 HDR 플라스미드 (h) 및 AFF4 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 AFF4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 AFF4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.