ACLP/AEBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403540-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACLP/AEBP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACLP/AEBP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACLP/AEBP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AEBP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACLP/AEBP1 Anticorpo (G-1): sc-271374
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACLP/AEBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403540-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACLP/AEBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403540-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AEBP1 codifica a proteína 1 de ligação ao potenciador de adipócitos, também conhecida como ACLP, uma proteína secretada e associada à matriz extracelular que se liga ao colagénio e contribui para a montagem da matriz, a remodelação tecidular e a adesão célula–matriz. Em contextos estromais e mesenquimatosos, a AEBP1 está associada a programas de sinalização pró-fibróticos e inflamatórios, influenciando a ativação de fibroblastos, a reparação de feridas e a organização da matriz extracelular vascular. Alterações na expressão de AEBP1/ACLP foram descritas em várias doenças fibróticas e em múltiplos microambientes tumorais, onde se correlacionam com mudanças na composição do estroma, na invasividade e na modulação imunitária. Estas características tornam a AEBP1 um alvo útil para estudar a biologia da matriz extracelular, a comunicação entre fibroblastos e células imunitárias e vias de remodelação que moldam a homeostase tecidular e a progressão da doença.
ACLP/AEBP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AEBP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AEBP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AEBP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AEBP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.