Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO 15-LO2 (m): sc-419090
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- 15-LO2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique 15-LO2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: 15-LO2 Antibody (F-10): sc-376795
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO 15-LO2 (m) | sc-419090 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Alox8 code l’arachidonate 15‑lipoxygénase 2 (15‑LO2), une dioxygénase à fer non héminique qui oxygène les acides gras polyinsaturés pour produire des médiateurs lipidiques bioactifs. Dans les tissus murins, les oxylipines dérivées de la 15‑LO2 peuvent moduler l’équilibre rédox, le remodelage des lipides membranaires et la signalisation inflammatoire via les réseaux des eicosanoïdes et de la peroxydation lipidique. L’activité d’Alox8 s’articule avec les voies de l’immunité innée et la biologie de la barrière épithéliale en façonnant des profils locaux de médiateurs qui influencent la production de cytokines et le recrutement des leucocytes. Une signalisation lipidique dépendante des lipoxygénases dérégulée a été associée à des phénotypes inflammatoires et à des réponses au stress métabolique, faisant d’Alox8 un nœud pertinent pour étudier des circuits de médiateurs lipidiques liés aux maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO 15-LO2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Alox8 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Alox8, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Alox8 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine 15-LO2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Alox8 pour l'étude de la signalisation de 15-LO2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Alox8 essentiels à la fonction de 15-LO2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Alox8 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le 15-LO2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le 15-LO2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Alox8. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le 15-LO2 plasmide HDR (m) et le 15-LO2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Alox8 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Alox8 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.