α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422904

개요

Sgca는 골격근과 심장근에서 사코렘마(sarcolemma)를 안정화하고 힘 전달을 지지하는 디스트로핀–당단백질 복합체(dystrophin–glycoprotein complex) 내 사코글리칸 복합체의 핵심 막관통 성분인 α-사코글리칸(α-sarcoglycan)을 암호화한다. α-사코글리칸은 세포외기질을 세포골격과 연결함으로써 수축 중 막의 무결성과 기계적 신호전달(mechanotransduction)에 기여하며, 수축으로 유발되는 손상으로부터 근섬유를 보호한다. Sgca의 기능이 교란되면 디스트로핀 관련 단백질 복합체의 조립이 흐트러지고 근섬유 안정성이 저하되어, 모델 시스템에서 근이영양증 유사 표현형이 나타나는 분자적 근거를 제공한다. 따라서 마우스 Sgca는 사코렘마 부착 신호전달, 근육 퇴행/재생 프로그램, 그리고 하위의 염증 및 섬유화성 리모델링 경로를 연구하는 데 중요한 표적이다.

α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sgca 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sgca 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sgca의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 α-sarcoglycan 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 α-sarcoglycan 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sgca 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• α-sarcoglycan 기능에 중요한 Sgca 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sgca 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 α-sarcoglycan CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sgca 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  α-sarcoglycan HDR 플라스미드 (m) 및 α-sarcoglycan HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sgca 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sgca 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.