α-2 antiplasmin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-403792

Übersicht

SERPINF2 kodiert das menschliche α-2-Antiplasmin, einen zirkulierenden Serinprotease-Inhibitor, der als wichtigste physiologische Hemmung von Plasmin fungiert und ein zentraler Regulator der Fibrinolyse ist. Durch die Bildung stabiler Komplexe mit Plasmin und durch die Einbindung in Fibrin via Faktor XIIIa begrenzt α-2-Antiplasmin den Abbau von Fibringerinnseln und trägt dazu bei, die Blutgerinnung und die extrazelluläre Proteolyse im Gleichgewicht zu halten. Diese Funktion verknüpft SERPINF2 mit dem Plasminogen-Aktivierungssystem, dem Fibrin-Remodeling und nachgelagerten Effekten auf Matrixumsatz und vaskuläre Homöostase. Veränderte SERPINF2-Funktion oder -Expression wurde mit einer dysregulierten fibrinolytischen Kapazität in Verbindung gebracht und wird im Kontext von Blutungs- und Thrombosephänotypen untersucht, ebenso wie in entzündlichen und Gewebe-Remodeling-Situationen, in denen die Plasminaktivität eine wesentliche Rolle spielt.

Das α-2 antiplasmin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SERPINF2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SERPINF2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SERPINF2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die α-2 antiplasmin-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SERPINF2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der α-2 antiplasmin-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SERPINF2-Exone abzielen, die für die α-2 antiplasmin-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SERPINF2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom α-2 antiplasmin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom α-2 antiplasmin CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SERPINF2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das α-2 antiplasmin HDR-Plasmid (h) und α-2 antiplasmin HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SERPINF2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SERPINF2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.