ZDHHC7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405072

Übersicht

ZDHHC7 kodiert eine Palmitoyltransferase der DHHC-Familie, die die S‑Palmitoylierung von Substratproteinen katalysiert – eine reversible Lipidmodifikation, die Membranassoziation, Transport (Trafficking), Stabilität und Signaloutput reguliert. Durch die Kontrolle der palmitoylierungsabhängigen Lokalisation von Signal- und Adapterproteinen beeinflusst ZDHHC7 Prozesse wie rezeptornahe Signalübertragung, vesikulären Transport und die Organisation von Membran-Mikrodomänen. Fehlregulierte Palmitoylierung wird mit veränderter Wachstums- und Überlebenssignalgebung, der Funktion von Immunzellen und der neuronalen Physiologie in Verbindung gebracht, was ZDHHC7 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung posttranslationaler Lipidierungsnetzwerke in krankheitsrelevanten Kontexten macht. Die Untersuchung von ZDHHC7 hilft zu klären, wie Palmitoylierungsdynamiken das Crosstalk zwischen Signalwegen und die Proteostase unter Stress- oder transformationsassoziierten Bedingungen prägen.

Das ZDHHC7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des ZDHHC7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des ZDHHC7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von ZDHHC7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die ZDHHC7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von ZDHHC7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der ZDHHC7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf ZDHHC7-Exone abzielen, die für die ZDHHC7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere ZDHHC7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom ZDHHC7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom ZDHHC7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des ZDHHC7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das ZDHHC7 HDR-Plasmid (h) und ZDHHC7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von ZDHHC7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten ZDHHC7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.