ZCCHC6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418151

Descripción general

ZCCHC6 (también conocido como TUT7) codifica una uridililtransferasa terminal que contiene un dedo de zinc tipo CCHC y que cataliza la uridilación en 3′ de diversos sustratos de ARN, influyendo en la estabilidad y la degradación del ARN. Es un efector clave en la regulación génica posranscripcional, ya que actúa sobre precursores y miRNAs maduros y participa en vías que acoplan la adición de colas al ARN con su recambio exonucleolítico. ZCCHC6 se ha vinculado con la regulación de transcriptomas de la inmunidad innata y de respuesta al estrés mediante la modulación del procesamiento y la vigilancia del ARN. La uridilación del ARN desregulada y la actividad alterada de ZCCHC6 se han asociado con perturbaciones de la homeostasis de los miRNAs y de programas de expresión génica relevantes para el cáncer y fenotipos inflamatorios.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZCCHC6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZCCHC6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZCCHC6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZCCHC6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZCCHC6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZCCHC6 para la investigación de la señalización de ZCCHC6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ZCCHC6 críticos para la función de ZCCHC6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZCCHC6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZCCHC6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZCCHC6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZCCHC6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZCCHC6 (h) y el plásmido HDR ZCCHC6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZCCHC6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZCCHC6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.