ZCCHC6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-418151

概要

ZCCHC6（別名：TUT7）は、CCHC型亜鉛フィンガーを含むターミナル・ウリジリルトランスフェラーゼをコードしており、多様なRNA基質の3′末端ウリジル化を触媒することで、RNAの安定性や分解に影響を与えます。転写後の遺伝子発現制御における重要なエフェクターとして、前駆体および成熟miRNAに作用し、RNAのテーリング（末端修飾）とエキソヌクレアーゼによる分解を連動させる経路にも関与します。また、RNAのプロセシングや監視機構の調節を通じて、自然免疫およびストレス応答性トランスクリプトームの制御に関連することが示されています。RNAウリジル化の破綻やZCCHC6活性の変化は、miRNA恒常性の乱れや、がんおよび炎症性表現型に関わる遺伝子発現プログラムの異常と関連づけられています。

ZCCHC6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZCCHC6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZCCHC6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZCCHC6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZCCHC6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZCCHC6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZCCHC6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZCCHC6の機能に不可欠なZCCHC6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZCCHC6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZCCHC6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZCCHC6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZCCHC6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZCCHC6 HDRプラスミド（h）および ZCCHC6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZCCHC6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZCCHC6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。