ZCCHC14 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411686

Descripción general

ZCCHC14 codifica una proteína nuclear de tipo dedo de zinc CCHC implicada en funciones de unión a ARN que influyen en la regulación génica postranscripcional, incluida la estabilidad y el procesamiento del ARN. Se ha relacionado con vías que gobiernan el metabolismo del ARN y el control de programas de expresión génica que configuran la homeostasis celular. Evidencia emergente vincula a ZCCHC14 con interacciones virus–huésped, en consonancia con los roles de los factores asociados al ARN con unión a zinc en la regulación del uso del ARN viral y de las respuestas del transcriptoma del huésped. La desregulación de las proteínas de unión a ARN y de las redes de procesamiento de ARN es ampliamente relevante para la señalización oncogénica y las transiciones de estado celular, lo que convierte a ZCCHC14 en un nodo útil para estudios mecanísticos en estos contextos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ZCCHC14 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ZCCHC14 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ZCCHC14 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ZCCHC14 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ZCCHC14.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ZCCHC14 para la investigación de la señalización de ZCCHC14, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ZCCHC14 críticos para la función de ZCCHC14
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ZCCHC14 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ZCCHC14 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ZCCHC14 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ZCCHC14. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ZCCHC14 (h) y el plásmido HDR ZCCHC14 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ZCCHC14 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ZCCHC14 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.