ZADH2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-408358

概要

ZADH2（zinc-binding alcohol dehydrogenase domain-containing protein 2）は、アルコール脱水素酵素様の亜鉛結合モチーフを備えた推定オキシドレダクターゼをコードしており、細胞内のレドックス反応および代謝に関与する可能性が示唆されます。より広い脱水素酵素／還元酵素群の一員として、ZADH2は、脂質やアルデヒドの処理、酸化ストレス応答、ミトコンドリアまたは細胞質における代謝恒常性と交差する補因子依存性の酵素反応プロセスに影響を与えると考えられます。レドックス酵素や代謝酵素活性の変動は、ヒト組織における増殖・分化・ストレス適応の変化と関連づけられることが多く、ZADH2は代謝リプログラミングや細胞状態制御の機構解明研究において有用な標的となります。組織コンテキストを横断したZADH2の発現と機能に関する継続的な検討は、単一の疾患特異的モデルというよりも、経路（パスウェイ）志向の研究での活用を支持しています。

ZADH2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZADH2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZADH2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZADH2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZADH2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZADH2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZADH2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZADH2の機能に不可欠なZADH2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ZADH2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZADH2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZADH2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZADH2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZADH2 HDRプラスミド（h）および ZADH2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZADH2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZADH2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。