VEZF1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423670

Descripción general

Vezf1 codifica VEZF1, un factor de transcripción con dedos de zinc enriquecido en contextos endoteliales vasculares y hematopoyéticos, que regula programas de expresión génica necesarios para la angiogénesis embrionaria y el patrón vascular. VEZF1 participa en el control de la diferenciación endotelial, la brotación de vasos y el mantenimiento de la integridad vascular mediante la coordinación de redes transcripcionales vinculadas a la migración celular, la remodelación de la matriz extracelular y vías de señalización del desarrollo. La actividad alterada de Vezf1 se ha asociado con defectos en la formación de vasos sanguíneos y letalidad durante el desarrollo en modelos murinos, y sus funciones reguladoras lo hacen relevante para el estudio de malformaciones vasculares y de una vascularización tisular deficiente. Como proteína nuclear de unión al ADN, VEZF1 también ofrece un punto de entrada manejable para analizar el control transcripcional de la especificación del linaje endotelial.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO VEZF1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Vezf1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Vezf1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Vezf1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína VEZF1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Vezf1 para la investigación de la señalización de VEZF1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Vezf1 críticos para la función de VEZF1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Vezf1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido VEZF1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido VEZF1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Vezf1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR VEZF1 (m) y el plásmido HDR VEZF1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Vezf1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Vezf1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.