USP51 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414805

Descripción general

USP51 codifica una proteasa específica de ubiquitina que participa en la desubiquitinación, un paso regulador clave que controla la estabilidad, la localización y la salida de señalización de las proteínas. Al revertir la conjugación de ubiquitina, USP51 puede influir en la proteostasis y en la dinámica de complejos multiproteicos, con efectos posteriores sobre la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la señalización adaptativa al estrés. La actividad alterada de las desubiquitinasas se vincula con frecuencia a una función desregulada del sistema ubiquitina–proteasoma observada en la biología del cáncer y en otros trastornos que implican inestabilidad genómica o señalización aberrante. Por ello, USP51 resulta de interés para analizar la regulación de vías dependientes de la ubiquitina e identificar dependencias específicas del contexto en modelos celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO USP51 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen USP51 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del USP51 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de USP51 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína USP51.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en USP51 para la investigación de la señalización de USP51, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de USP51 críticos para la función de USP51
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de USP51 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido USP51 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido USP51 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus USP51. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR USP51 (h) y el plásmido HDR USP51 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología USP51 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana USP51 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.