Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UGP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408778
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- UGP2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico UGP2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: UGP2 Anticuerpo (B-3): sc-377089
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
UGP2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-408778 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
UGP2 codifica la UDP-glucosa pirofosforilasa 2, una enzima citosólica que cataliza la formación reversible de UDP-glucosa a partir de glucosa-1-fosfato y UTP, aportando un nucleótido de azúcar activado central para la biosíntesis. La UDP-glucosa sustenta el metabolismo del glucógeno y contribuye a las vías de glicosilación al proporcionar precursores para la producción de glicoconjugados y glicolípidos, lo que influye en el tráfico de proteínas y en las interacciones célula–célula. Por su papel en el flujo de carbohidratos y la homeostasis de los glicanos, UGP2 se estudia con frecuencia en contextos de reprogramación metabólica, procesamiento en RE/Golgi y adaptación al estrés. Los cambios en la disponibilidad de UDP-glucosa y en los patrones de glicosilación son ampliamente relevantes para mecanismos implicados en trastornos metabólicos y proliferativos, lo que impulsa estudios funcionales de UGP2 en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO UGP2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen UGP2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del UGP2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de UGP2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína UGP2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en UGP2 para la investigación de la señalización de UGP2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de UGP2 críticos para la función de UGP2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de UGP2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido UGP2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido UGP2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus UGP2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR UGP2 (h) y el plásmido HDR UGP2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología UGP2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana UGP2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.