UBE2E3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423576

개요

Ube2e3는 마우스 유비퀴틴-접합 효소 UBE2E3를 암호화하며, 이는 유비퀴틴–프로테아좀 시스템의 E2 구성요소로서 E1 효소로부터 유비퀴틴을 받아 E3 리가아제에 전달함으로써 단백질 turnover와 신호전달을 조절합니다. 유비퀴틴화 과정을 통해 UBE2E3는 기질 단백질의 안정성과 그에 따른 하위 전사 프로그램을 조정하여 단백질 항상성(proteostasis), 스트레스 반응, 그리고 세포주기 및 DNA 손상 관련 경로의 제어에 기여합니다. 단백질 품질 관리와 조절성 유비퀴틴 신호전달의 조절자로서 UBE2E3 활성의 변화는 신경생물학, 염증, 암 관련 표현형과 연관된 맥락에서 세포 항상성에 영향을 줄 수 있습니다. UBE2E3 의존적 유비퀴틴화 네트워크를 연구하면 E2 효소가 조직 전반에서 경로의 동역학과 기질 특이성을 어떻게 미세 조정하는지 규명하는 데 도움이 됩니다.

UBE2E3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ube2e3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ube2e3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ube2e3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 UBE2E3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 UBE2E3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ube2e3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• UBE2E3 기능에 중요한 Ube2e3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ube2e3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• UBE2E3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 UBE2E3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ube2e3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  UBE2E3 HDR 플라스미드 (m) 및 UBE2E3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ube2e3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ube2e3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.