TUSC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407062

概要

TUSC2（tumor suppressor candidate 2、腫瘍抑制候補遺伝子2。FUS1としても知られる）は、ミトコンドリアに関連する小型タンパク質をコードしており、活性酸素種（ROS）の制御、カルシウムシグナル伝達、ストレス誘導性アポトーシスなどを含む細胞恒常性の調節に関与すると考えられています。TUSC2はPI3K/AKTやMAPKシグナル伝達といったキナーゼ駆動性経路の調節とも関連づけられており、上皮細胞における増殖および生存プログラムに影響を及ぼします。TUSC2の発現低下または機能喪失は複数の腫瘍タイプでしばしば認められ、ミトコンドリア機能の変化や増殖制御の破綻と関連しています。これらの特性により、TUSC2は、ミトコンドリアから核へのシグナル伝達、酸化ストレス応答、ならびにがん生物学に関連する経路依存性を解析するための有用な標的となります。

TUSC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTUSC2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TUSC2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TUSC2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TUSC2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TUSC2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TUSC2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TUSC2の機能に不可欠なTUSC2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TUSC2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TUSC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTUSC2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TUSC2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TUSC2 HDRプラスミド（h）および TUSC2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTUSC2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTUSC2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。