Partículas Lentivirales de Activación (h) TrxR2: sc-402671-LAC

TXNRD2 codifica la tioredoxina reductasa mitocondrial TrxR2, una selenoproteína que mantiene a la tioredoxina-2 en su estado reducido para sostener la homeostasis redox mitocondrial. Al aportar equivalentes reductores al sistema de tioredoxina, TrxR2 ayuda a controlar las especies reactivas de oxígeno, el equilibrio de los enlaces disulfuro en proteínas y la señalización sensible al estado redox que influye en la apoptosis y en las respuestas celulares al estrés. La actividad de TXNRD2 se interseca con las redes antioxidantes mitocondriales y con la fosforilación oxidativa, vinculándola a procesos como la adaptación metabólica y el mantenimiento de la integridad mitocondrial. La alteración de la función de TXNRD2/TrxR2 se ha asociado con fenotipos relacionados con el estrés oxidativo y se estudia en contextos que incluyen la neurodegeneración, la disfunción cardiometabólica y la biología del cáncer, donde el control redox mitocondrial es una variable clave.

Las partículas de activación lentiviral TrxR2 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de TXNRD2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral TrxR2 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción TXNRD2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de TrxR2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo TXNRD2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.