TRIM69 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404906

概要

TRIM69は、RINGドメイン、B-boxドメイン、ならびにタンパク質間相互作用やユビキチン依存性シグナル伝達を仲介するコイルドコイルドメインを特徴とする、トリパルタイトモチーフ（TRIM）ファミリーのE3ユビキチンリガーゼをコードしています。TRIM69は、基質タンパク質の安定性や下流の転写応答を制御することで、インターフェロン刺激経路の調節や抗ウイルス制限機構の制御など、自然免疫調節に関与することが示唆されています。ユビキチン化とプロテオスタシスに影響を与えることで、TRIM69は炎症プログラムと交差する細胞ストレス応答やシグナル伝達ネットワークを形成し得ます。TRIMファミリー活性の変化は、免疫調節異常やがん化シグナル伝達と広く関連するため、TRIM69はこれらの文脈における機構解析研究の有用な標的となります。

TRIM69 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTRIM69遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TRIM69内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TRIM69のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRIM69タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRIM69シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TRIM69欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRIM69の機能に不可欠なTRIM69エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TRIM69ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRIM69 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTRIM69 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TRIM69遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRIM69 HDRプラスミド（h）および TRIM69 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTRIM69ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTRIM69標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。