TRIM34 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417920

概要

TRIM34は、自然免疫の制御および抗ウイルス制限に関与するとされる、TRIMファミリーに属するトリパルタイトモチーフ含有E3ユビキチンリガーゼをコードします。TRIM34はRINGドメイン、B-boxドメイン、コイルドコイルドメインを介して、ユビキチン依存的なシグナル伝達やタンパク質のターンオーバーに影響を与え、インターフェロン刺激応答やパターン認識受容体（PRR）シグナル伝達などの経路を形成します。TRIMファミリーの活性変化は、炎症の制御異常や宿主―病原体相互作用の異常としばしば関連するため、TRIM34は免疫恒常性を調節する機構の研究において重要です。また、TRIM34は感染生物学や免疫関連疾患表現型のシステムレベル解析において、候補制御因子としても用いられます。

TRIM34 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTRIM34遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TRIM34内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TRIM34のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRIM34タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRIM34シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TRIM34欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRIM34の機能に不可欠なTRIM34エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TRIM34ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRIM34 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTRIM34 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TRIM34遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRIM34 HDRプラスミド（h）および TRIM34 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTRIM34ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTRIM34標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。